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紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)使用的方法步驟
更新時(shí)間:2023-05-12 文章更新于2023-05-12 點(diǎn)擊次數(shù):994次
紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)(RedBloodCellMicronucleusTest,RBCMNTest)是一種常見(jiàn)的體外細(xì)胞毒性測(cè)試方法,用于評(píng)估化學(xué)物質(zhì)、藥物或其他化合物對(duì)人體血液系統(tǒng)的毒性效應(yīng)。微核是由于DNA損傷而形成的小型胞核,通常發(fā)生在有絲分裂期間。正常情況下,當(dāng)一次有絲分裂結(jié)束后,胞核會(huì)重新組合和分配到兩個(gè)新的細(xì)胞中;然而,當(dāng)DNA損傷發(fā)生時(shí),細(xì)胞無(wú)法完成DNA修復(fù)并重新組合胞核。這時(shí),新細(xì)胞中就會(huì)形成一個(gè)或多個(gè)額外的小型胞核,即微核。因此,觀察微核數(shù)量變化可以比較敏感地反映DNA的損傷程度。
紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)方法步驟:
1.準(zhǔn)備樣本:收集靜脈血,避免使用抗凝劑,并將樣本盡快送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理。
2.處理樣本:將血液加入適量的培養(yǎng)基,使其接觸到不同濃度的測(cè)試物質(zhì),通常為化學(xué)物質(zhì)或藥物。處理后,在不同時(shí)間點(diǎn)采集血標(biāo)本。
3.制備細(xì)胞涂片:將血液沉淀在載玻片上,然后固定、染色并顯微鏡下觀察到底是否有微核。
4.計(jì)算微核數(shù)目:在顯微鏡下計(jì)算每個(gè)細(xì)胞的總個(gè)數(shù)和微核的數(shù)量。最終,計(jì)算出微核率(micronucleusfrequency,MNF)或微核指數(shù)(micronucleusindex,MNI)對(duì)測(cè)試物質(zhì)的毒性進(jìn)行評(píng)估。
優(yōu)點(diǎn):
1.反映DNA損傷敏感、準(zhǔn)確程度高。
2.實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、成本低。
3.早期發(fā)現(xiàn)化學(xué)物質(zhì)、藥物或其他化合物的毒性效應(yīng),有效保護(hù)人類(lèi)健康。
紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)是一種常用的體外細(xì)胞毒性測(cè)試方法,可以準(zhǔn)確反映DNA損傷程度,廣泛應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)和藥物等對(duì)人類(lèi)健康的毒性評(píng)估。然而,該方法也存在一些缺點(diǎn)和局限性,需要在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中認(rèn)真分析和考慮。為了更好地保護(hù)人類(lèi)健康,需要不斷完善和改進(jìn)技術(shù),提高其靈敏度和可靠性。